بررسی اثر گیرنده CB2 سیستم کانابینوئیدی در ناحیهCA1 هیپوکامپ بر فراموشی ناشی از D-AP5 در موش صحرای

جزئیات و دریافت

این پایان نامه در قالب فرمت word قابل ویرایش ، آماده پرینت و ارائه به عنوان پروژه پایانی میباشد.

یادگیری و حافظه از جمله مکانیسم های پیچیده مغزی هستند که مسیر های نورونی مختلفی در ایجاد و تثبیت آنها نقش دارد. بر اساس پژوهش های انجام شده سیستم وابسته به گلوتامات در ناحیه ی هیپوکامپ مغز در ایجاد حافظه موثر بوده و همچنین سیستم کانابینوییدی در این ناحیه در مسیر های مرتبط با حافظه دخیل هستند. در این پژوهش ما به بررسی اثر سیستم کانابینوییدی از طریق گیرنده CB2 بر روی حافظه تخریب شده ناشی از آنتاگونیست گیرنده NMDA (D-AP5  ) درناحیه CA1 هیپوکامپ موش صحرایی نر نژاد ویستار می پردازیم. برای بررسی حافظه موش ها از روش بررسی اجتنابی مهاری (غیر فعال) با مدل      step-throug استفاده شده و حافظه موش ها 24 ساعت پس از آموزش مورد بررسی قرار گرفته است.نتایج حاصل از این پژوهش نشان میدهد که  تزریق درون مغزی(ICV,Intra-CA1) D-AP5  (µg/rat 0.5 & 0.75) موجب تخریب حافظه شده و همچنین تزریق درون مغزی آنتاگونیست اختصاصی گیرنده CB2 (AM630) به صورت وابسته به دوز(ng/rat 100)موجب ایجاد فراموشی میگردد. در صورتی که تزریق درون مغزی GP1a 50,75,100 & 125 ng/rat))- آگونیست اختصاصیCB2    - تغییر معنا داری درتثیبت حافظه ایجاد نکرده است. تزریق دوز(50ng/rat) AM630  و همچنین دوز غیر موثر GP1a ( (50ng/rat پنج دقیقه پیش از دوزهای موثر D-AP5 ( (0.75 and 0.50µg/rat توانستند اثر تخریب حافظه D-AP5  را بلوکه کند.با این وجود تزریق دوز  غیر موثر 50ng/µL ) AM630) وهمچنین دوز غیر موثر GP1a( (50ng/rat  پنج دقیق پیش ازD-AP5 (µg/rat  0.25 ) تغییر معنا داری در حافظه موش ها ایجاد نکرد.

نتایج حاصل از این پژوهش  نشان داد که هم آگونیست و هم آنتاگونیست گیرندهCB2 قادر به اصلاح فراموشی ناشی از D-AP5 هستند و این مسئله شاید نشان دهنده اثر تعدیل کنندگی گیرنده CB2 باشد.همچنین می توان بیان داشد که احتمالا بین سیستم کانابینوئیدی و سیستم گلوتاماتی در ناحیه CA1 تداخل وجود دارد.

-1.ضرورت و اهمیت موضوع

صد سال پس از توصیف بیماری آلزایمربرای اولین بار ، این بیماری هنوز به عنوان یکی از مهمترین و ناتوان کننده ترین مشکلات سلامتی جوامع شناخته می شود . بیماری آلزایمر از جمله مهم ترین علل فراموشی است در حالی که بیماری های دیگری مثل  مشکلات عروقی  مغزی،فرموشی Lewy bodyو فراموشی Frontotemporal و همچنین بیماری هایی مثل هانتینگتون ، پارکینسون و آسیب های ناشی از ضربات به مغز نیزمیتوانند از عوامل فراموشی باشند. بررسی های انجام شده در سال 2005 نشان می دهد که3/24 میلیون نفر در جهان دچار فراموشی هستند.که به این رقم هر سال 6/4 میلیون مورد اضافه می شود(یک مورد جدید در هر 7 ثانیه). هر بیست سال این تعداد دو برابر می شود تا در سال 2040 به مقدار 1/81 میلیون می رسد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

با توجه به آمار رو به رشد فراموشی و بیماری های مرتبط با آن ،تلاش در جهت شناسایی مکانیسم ها و مسیر های مرتبط با تشکیل حافظه و ایجاد فراموشی می تواند در مسیر یافتن درمان وهمچنین پیشگیری از این بیماری ها راه گشا باشد.

1-2-بیان مسئله

گلوتامات مهمترین انتقال دهنده عصبی تحریکی و همچنین فراوان ترین آمینو اسید در رژیم غذایی می باش[6].گیرنده های NMDA  از یک کمپلکس چهار قسمتی تشکیل شده که دارای ساختار های همولوگ متعدد است. این گیرنده در فرم های متعددی از حافظه و یادگیری تاثیر مهمی دارد[7]. به نظر میرسد که انعطاف پذیری نورونی در ناحیهCA1 عمدتا مربوط به گیرنده NMDA است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ارتباط انعطاف پذیری نورونی با حافظه و یادگیری یکی از یافته های بزرگ نوروشیمیایی است و اساس حافظه و یادگیری شناخته میشود.(Hebbian theory)

سیناپس های وابسته به NMDA  نقش حیاتی را در القای   Long term potentiation(LTP) (تغییر سیناپسی که می تواند موجب ایجاد نوعی از حافظه بلند مدت شود)دارد[9] ماده D-AP5 یک آنتاگونیست گیرندهNMDA است که برای ایجاد فراموشی و بررسی سیستم های وابسته به گلوتامات استفاده می شود[10].

گیرنده های کانابینوئیدی به دو صورت CB1وCB2 در بدن وجود دارند که هدف اصلی مشتقات کانابیس(که سر دسته آنها تترا هیدرو کانابینون می باشد)هستن [11] . پژوهش های پیشین تایید می کردند که گیرنده CB1   در مغز و گیرنده های CB2در سلول های محیطی و ایمنی و خونی بیان می شوند. در صورتی که مطالعات اخیر حاکی از بیان گیرنده CB2  هر چند به مقدار کمتر از CB1  در مغز است[12]. مطالعات نشان می دهند که گیرنده CB2  از طریق مهار تولید بتا آمیلوئید از پیشروی بیماری آلزایمر جلوگیری می کند.همچنین در بررسی دیگری مشخص شده که تحریک گیرنده CB1  در ناحیه CA1 هیپوکامپ موجب مهار گلوتامات می گردد[13،14]. از آنجا که بسیاری از عملکرد های گیرنده های CB1 و CB2  مشترک هستند .در این مطالعه ما با استفاده از آنتاگونیست گلوتامات (D-AP5)و فراموشی ناشی از آن اثر سیستم کانابینوئیدی را بررسی می کنیم.

1-3- اهداف مطالعه

1-3-1-هدف اصلی

بررسی اثر سیستم کانابینوئیدی برروی  نورون های وابسته به گلوتامات از طریق اثر گیرنده CB2 بر فراموشی ناشی از آنتاگونیست گیرنده کانابینوئید(D-AP5)

1-3-2-اهداف فرعی

بررسی اثر سیستم گلوتامات بر روی شکل گیری حافظه

بررسی سیستم کانابینوئیدی بر حافظه در ناحیه CA1

بررسی اثر سیستم کانابینوئیدی بر روی سیستم وابسته به گلوتامات